Introdução aos instrumentos e funções de cultura de células para troca de tecnologia experimental de células
A composição das células é geralmente dividida em quatro áreas: área de preparação, área de preparação, área de armazenamento e área estéril.
As principais funções da área de preparo são limpeza, desinfecção e preparo; A área de preparação é utilizada principalmente para a preparação de meios de cultura e reagentes; A área de armazenamento é utilizada para banco de células e armazenamento de mercadorias; A área estéril é o local onde o pessoal do laboratório troca de roupa, tampona e cultiva. O processo de cultivo celular pode ser dividido em quatro partes de acordo com suas funções: cultivo celular, armazenamento, preparo e esterilização.
1、 Instrumento de cultura de células e introdução
[1. Bancada super limpa]
A bancada ultra limpa de fluxo vertical é geralmente usada para cultura de células. Sob pressão positiva, não há vazamento de gás. Apenas o objeto operacional é protegido, mas a equipe e o ambiente do laboratório não são protegidos.
A irradiação ultravioleta realiza a função de esterilização. Esterilização ultravioleta (superfície) + esterilização por ozônio (canto morto, defletor fechado). Cada irradiação ultravioleta dura de 20 a 30 minutos e o ar é soprado por 10 minutos antes do uso (preste atenção à troca de ar na sala de cultura). A limpeza atinge a classe 100.
Após 3000 horas, a potência da lâmpada ultravioleta será reduzida para 70% da original. Recoloque o pano grosso do filtro na parte superior a tempo e remova-o regularmente para limpeza.
[2. Gabinete de Biossegurança]
Sob pressão negativa, o gás não vaza, o que não apenas protege a amostra, mas também foca na proteção do operador e do meio ambiente. As células de segurança secundárias carregam vírus (como hele / KB), amostras clínicas humanas primárias cultivadas (fungos), experimentos relacionados a lentivírus.
[3. cilindro de CO2]
Os cilindros de CO2 são usados principalmente para o armazenamento de gás CO2. No processo de cultura de células, a maioria das células precisa ser realizada sob a condição de que o teor de CO2 seja de 5%. O cilindro de CO2 é conectado principalmente à incubadora para a manutenção estável do conteúdo de CO2.
[4. Microscópio invertido]
O microscópio invertido é um equipamento necessário de rotina no trabalho diário do laboratório de cultura de células. É usado principalmente para entender o crescimento das células e observar a ocorrência de infecção. Se os fundos permitirem, recomenda-se escolher um microscópio de contraste de fase, um microscópio de anatomia, um microscópio de fluorescência, um sistema de gravação de vídeo ou um dispositivo de filmagem de lapso de tempo equipado com um sistema de câmera, que pode fotografar e registrar o crescimento celular em qualquer Tempo.
[5. Centrífuga de mesa]
A centrífuga é um instrumento especial que utiliza a força centrífuga para separar e precipitar o líquido misturado (contendo sólidos). É usado principalmente para preparar a suspensão celular, ajustar a densidade celular, lavar e coletar células. A taxa de centrifugação em cultura de células é geralmente 300xg (cerca de 1000rpm) por 5-10min. Uma velocidade de rotação muito alta causará a morte celular. De acordo com as diferentes necessidades, existem centrífugas mais funcionais para escolher, como centrífugas de grande capacidade, centrífugas de temperatura ajustável, centrífugas de alta velocidade e centrífugas de congelamento de baixa temperatura.
[6. incubadora de CO2]
O CO2 é um produto metabólico das células, componente essencial do crescimento celular, e também relacionado à manutenção do pH do meio de cultura. Na cultura de células, O2 e CO2 são condições necessárias para o crescimento celular. As incubadoras de CO2 têm tipos secos e úmidos, e as condições de cultura são geralmente definidas em 37 ℃ e 5% de CO2. A água na bandeja de água da incubadora de CO2 é impedida de ser contaminada por água estéril + reposição regular de 2 semanas + conservante (azida de sódio 0,02% ou sulfato de cobre 2%).
[7. Placa de contagem de células (dispositivo)]
O contador de células é um instrumento de contagem controlado por microcomputador que integra contagem, estatísticas e exibição. É confiável e conveniente de usar.
[8. Pipeta]
A principal função da pipeta é sugar e remover líquidos como meio de cultura durante a cultura de células. A principal faixa de medição utilizada na cultura de células consiste em 10ul/100ul/200ul/1000ul.