De acordo com diferentes usos, o meio de cultura pode ser dividido em meio de cultura básico, meio de cultura nutriente, meio de cultura de enriquecimento, meio de cultura seletivo, meio de cultura de identificação, meio de cultura anaeróbico, etc.

1. O meio básico é a base nutricional comumente necessária para a maioria dos microrganismos. Se um microrganismo tiver necessidades especiais, ele pode adicionar alguns ingredientes nessa base, como água peptonada, meio de cultura de caldo, ágar nutriente, etc. O meio de água peptonada a 1% é o meio básico mais simples. Este meio básico pode ser usado para cultura geral de enriquecimento bacteriano e teste de substrato índigo. Se forem adicionados indicadores e açúcares, será preparado em meio de fermentação de açúcar para teste de fermentação de açúcar e se tornará meio de identificação; Se a dosagem de cloreto de sódio for aumentada na água peptonada a 1% e o pH for aumentado para cerca de 8,6, ela se tornará água peptonada alcalina para a cultura de enriquecimento de Vibrio cholerae e se tornará um meio de enriquecimento especial.

2. O meio nutriente adiciona alguns nutrientes especiais, como glicose, sangue, soro, extrato de levedura, fatores de crescimento, etc. ao meio de cultura básico, para que bactérias com altas necessidades nutricionais possam crescer nele. Streptococcus pneumoniae, etc. precisam crescer em um meio contendo sangue ou soro; Ovos, batatas, glicerina, etc. devem ser adicionados ao meio de cultura de Mycobacterium tuberculosis. O meio nutriente mais utilizado é a placa de ágar sangue.

3. O meio de enriquecimento é geralmente um meio líquido, que é usado para a cultura de enriquecimento de bactérias. Ele pode ser usado amplamente ou especialmente. O meio de enriquecimento especial geralmente contém nutrientes especiais ou fatores de crescimento necessários para o crescimento de bactérias alvo.

4. Meio seletivo: o meio seletivo contém nutrientes (bactericidas) e agentes bacteriostáticos (seletores). Depois que a amostra é inoculada em tal meio, as bactérias não-alvo são inibidas em graus variados devido à inibição seletiva de agentes bacteriostáticos, o que é mais propício à proliferação ou separação de bactérias-alvo. A taxa de detecção positiva das bactérias alvo pode ser melhorada usando o meio seletivo por um certo período de tempo e depois inoculando-o no meio de identificação seletivo. Existem muitos tipos de agentes bacteriostáticos, como verde malaquita, verde brilhante, selenito de sódio, desoxicolato de sódio, sal biliar, sulfonato de tetrassulfeto de sódio e vários antibióticos. A quantidade de adição de agentes bacteriostáticos deve ser apropriada e precisa. Alguns são altamente tóxicos e alguns não são resistentes à febre alta. Atenção especial deve ser dada à preparação.

5. O meio diferencial é um substrato de reação e indicador adicionado ao meio de cultura para distinguir as características de determinados microrganismos e identificá-los. Pode ser dividido em meio de identificação geral e meio de identificação seletiva. O meio que é usado apenas para distinguir diferentes espécies microbianas é chamado de meio de identificação geral. Geralmente, esse tipo de meio não adiciona agentes bacteriostáticos, mas contém apenas indicadores, como o meio de ferro bisacarídeo de Kirschner, que contém glicose e lactose. O vermelho de fenol é usado como indicador para observar a mudança de cor do substrato de cultura e a superfície inclinada para determinar a capacidade de fermentação das bactérias a glicose e lactose. Adicione citrato de amônio férrico, após o cultivo, observar se há deposição negra para determinar se as bactérias decompõem os aminoácidos contendo enxofre na peptona para produzir sulfeto de hidrogênio; Outro exemplo é o ágar azul de metileno eosina, que contém lactose (substrato de reação) e azul de metileno eosina (indicador) para identificar Escherichia coli, bactérias patogênicas intestinais e outras bactérias diversas. O meio de identificação geral é caracterizado por conter indicadores na fórmula e pode ser utilizado para distinguir diferentes tipos de microrganismos. Alguns meios de identificação também podem ser usados ​​como necessidades especiais de bactérias para isolar e cultivar certas bactérias, como o ágar triptona de soja e o ágar sangue cor de chocolate. que contém lactose (substrato de reação) e eosina azul de metileno (indicador) para identificar Escherichia coli, bactérias patogênicas intestinais e outras bactérias diversas. O meio de identificação geral é caracterizado por conter indicadores na fórmula e pode ser utilizado para distinguir diferentes tipos de microrganismos. Alguns meios de identificação também podem ser usados ​​como necessidades especiais de bactérias para isolar e cultivar certas bactérias, como o ágar triptona de soja e o ágar sangue cor de chocolate. que contém lactose (substrato de reação) e eosina azul de metileno (indicador) para identificar Escherichia coli, bactérias patogênicas intestinais e outras bactérias diversas. O meio de identificação geral é caracterizado por conter indicadores na fórmula e pode ser utilizado para distinguir diferentes tipos de microrganismos. Alguns meios de identificação também podem ser usados ​​como necessidades especiais de bactérias para isolar e cultivar certas bactérias, como o ágar triptona de soja e o ágar sangue cor de chocolate.

Alguns inibidores e indicadores são adicionados ao meio de cultura para inibir o crescimento de algumas bactérias, promover a propagação da bactéria alvo e fazer com que as colônias bacterianas em crescimento tenham certas características para facilitar a identificação e seleção. Esse tipo de meio de cultura é chamado de meio de identificação seletiva. Por exemplo, SS Agar contém lactose (substrato de reação), vermelho neutro, citrato férrico de amônio (indicador), verde brilhante e sal biliar (agente bacteriostático) na fórmula do meio. Agentes bacteriostáticos, como verde brilhante e sal biliar, podem inibir o crescimento de bactérias Gram-positivas e algumas Escherichia coli, mas não têm efeito sobre Salmonella e Shigella. Além disso, a Escherichia coli pode fermentar a lactose para produzir ácido, tornando as colônias vermelhas. Salmonella e Shigella não fermentam lactose, e suas colônias são incolores. Se a bactéria produzir sulfeto de hidrogênio, ela reagirá com citrato de amônio férrico para formar precipitação de sulfeto ferroso, e o centro da colônia será preto ou marrom. Para atingir o objetivo de identificação.

Nos últimos anos, um meio de revelação de cor especial para algumas bactérias foi desenvolvido em casa e no exterior usando as enzimas específicas de algumas bactérias e selecionando os substratos correspondentes. Tem sido utilizado para o isolamento e identificação de bactérias e tem obtido bons resultados. Este meio de revelação de cor é, na verdade, também o meio de identificação. O princípio básico é adicionar a combinação de cromogênio (ou fluorogênio) e substrato de ação bacteriana no meio de cultura, e quando as bactérias contêm enzimas correspondentes, a combinação será decomposta para desenvolver cor (ou apresentar fluorescência). Por exemplo, o conjugado de glicosídeo de cromogênio é decomposto sob a ação da glicosidase para separar o glicosídeo do cromogênio e exibir a cor; Os conjugados de aminoácidos fluorescentes (sem fluorescência) exibem fluorescência separando aminoácidos de substâncias fluorescentes sob a ação da aminopeptidase. Cromógenos comuns para o desenvolvimento da cor são: α- Naftol β- Naftol, o-nitrofenol, p-nitrofenol, p-nitroanilina, fenolftaleína, 2-amino, 4-nitrobenzeno, etc; Os fluoróforos comumente usados ​​incluem 4-metilumbeliferona (também conhecido como 7-hidroxi-4-metilcumarina) e assim por diante. Atualmente, o meio de revelação de cor tem sido usado para o isolamento, identificação e cultura de uma variedade de bactérias ou fungos, como Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e outros meios de revelação de cor. α-Naftol β-Naftol, o-nitrofenol, p-nitrofenol, p-nitroanilina, fenolftaleína, 2-amino, 4-nitrobenzeno, etc; Os fluoróforos comumente usados ​​incluem 4-metilumbeliferona (também conhecido como 7-hidroxi-4-metilcumarina) e assim por diante. Atualmente, o meio de revelação de cor tem sido usado para o isolamento, identificação e cultura de uma variedade de bactérias ou fungos, como Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e outros meios de revelação de cor. α-Naftol β-Naftol, o-nitrofenol, p-nitrofenol, p-nitroanilina, fenolftaleína, 2-amino, 4-nitrobenzeno, etc; Os fluoróforos comumente usados ​​incluem 4-metilumbeliferona (também conhecido como 7-hidroxi-4-metilcumarina) e assim por diante. Atualmente, o meio de revelação de cor tem sido usado para o isolamento, identificação e cultura de uma variedade de bactérias ou fungos, como Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e outros meios de revelação de cor.

Existem também alguns meios de identificação que usam vários sistemas enzimáticos exclusivos das bactérias para decompor e utilizar vários açúcares específicos, álcoois, aminoácidos ou outros substratos para produzir ácidos, gases, álcalis ou outras substâncias visíveis, de modo a identificar bactérias, como comumente meios bioquímicos usados.

O meio de cultura utilizado para o teste de características bioquímicas de bactérias é caracterizado pela adição de um substrato específico ao meio de cultura básico isento de açúcar e pela adição de um indicador. Uma série de resultados de reações bioquímicas de bactérias em tal meio de cultura são finalmente exibidos através do indicador. Este tipo de meio é meio de identificação de reação bioquímica. De acordo com a dosagem, pode ser dividido em meio bioquímico maior e meio bioquímico menor. Vale a pena notar que alguns componentes do meio de teste bioquímico são afetados por muitos fatores, como alta temperatura e pH. ao preparar e usar, deve ser rigorosamente controlado de acordo com a situação real para evitar que os componentes efetivos sejam danificados, de modo a garantir seu efeito de uso.

6. O meio anaeróbio é um meio para isolamento, cultura e identificação de bactérias anaeróbicas, denominado meio anaeróbio. Devido à falta de várias enzimas necessárias para o metabolismo aeróbio, como citocromo e citocromo oxidase, catalase e peroxidase e superóxido dismutase, os anaeróbios são incapazes de realizar o metabolismo aeróbico devido aos seus próprios defeitos metabólicos, e a energia gerada pela fermentação anaeróbica é insuficiente. Portanto, os anaeróbios não podem crescer e sobreviver em ambiente atmosférico normal. Para permitir que as bactérias anaeróbicas cresçam normalmente, é necessário preparar um meio especial com nutrientes ricos, baixo potencial redox e fatores de crescimento especiais.

O meio de cultura anaeróbio é geralmente preparado a partir de extratos de coração, cérebro ou outros órgãos, e muitas vezes é necessário adicionar tioglicolato de sódio, cisteína, resíduo de carne, ferro reduzido, carvão ativado e outros agentes redutores ou materiais desoxidantes. Para observar o teor de oxigênio do meio de cultura, azurol ou azul de metileno também pode ser adicionado ao meio de cultura líquido como indicador redox. Coração, extrato de cérebro, massa de fígado e resíduos de carne contêm ácidos graxos insaturados, que podem absorver oxigênio no meio de cultura. O tioglicolato de sódio e a cisteína são fortes agentes redutores, que podem consumir oxigênio dissolvido no meio de cultura. Carvão ativado seco e algodão absorvente também podem absorver oxigênio no meio de cultura. Portanto, o objetivo de adicionar agente redutor e material absorvente ao meio de cultura é criar um ambiente anóxico do meio de cultura e manter um baixo potencial redox. Além disso, uma camada de parafina líquida pode ser adicionada na superfície do meio de cultura para isolar o contato entre o meio de cultura e a atmosfera.

7. Líquido de cultura de células (LCL) refere-se ao líquido utilizado para cultivar, preservar e transportar tecidos, órgãos e células vivos in vitro para diversos fins. Em essência, é um ambiente de nutrientes que simula artificialmente o crescimento in vivo, para que as células possam crescer e se reproduzir nesse ambiente. Por ser claro o número de seus componentes e poder observar diversas alterações biológicas do objeto estudado regulando um determinado componente, é amplamente utilizado nas pesquisas de biologia celular. Os componentes da solução de cultura de células incluem principalmente água, aminoácidos, vitaminas, carboidratos, íons inorgânicos, fatores de crescimento, etc. Esses componentes devem ser rigorosamente selecionados e testados antes de serem usados. A água utilizada deve atender aos requisitos da água de teste grau 2 (CB/T 6682-1992).