1. Bancada de trabalho ultra limpa

Atualmente, a grande maioria dos laboratórios de células usa bancadas ultra limpas para obter uma operação asséptica, com operação simples, instalação conveniente, pequena ocupação de espaço e bom efeito de purificação. A Purificação Anhui Renhe apresenta dois tipos principais de bancadas super limpas - tipo fluxo lateral (tipo vertical) e tipo fluxo externo (tipo fluxo laminar horizontal). O princípio de funcionamento é geralmente que o ar interno é inicialmente filtrado pelo filtro grosso, pressionado na caixa de pressão estática pelo ventilador centrífugo e, em seguida, filtrado pelo filtro de ar de alta eficiência. O fluxo de ar limpo resultante passa pela área estéril a uma certa velocidade de vento seccional uniforme, formando assim um ambiente de trabalho livre de poeira e estéril com alta limpeza.

(1) Mesa de trabalho de fluxo lateral: o fluxo de ar após a purificação do ar flui da esquerda ou direita para o lado oposto através da mesa de trabalho, ou de cima para baixo ou de baixo para cima, formando uma barreira de fluxo de ar para manter a área de trabalho estéril. A estrutura da mesa de trabalho é fechada;

(2) Mesa de trabalho de saída: o ar purificado flui em direção ao operador, para que o fluxo de ar estranho não seja misturado na operação. A estrutura da mesa de trabalho é aberta, mas a operação experimental de substâncias nocivas é desfavorável ao operador. A mesa de trabalho ultra limpa deve ser verificada regularmente quanto à limpeza pelos departamentos relevantes. A limpeza da mesa de trabalho ultra limpa que atende aos requisitos deve atingir o Grau 100, e o tamanho das partículas deve ser testado com um contador de partículas de poeira ≤ 5 μ O número de partículas de poeira em m não deve exceder 3,5/L; O fluxo de ar deve ser controlado dentro de 0,75-1,0m3/s; O número médio de colônias bacterianas é menor que 1, e o filtro precisa ser substituído se necessário de acordo com a esterilidade.

2. Microscópio

O microscópio invertido é um equipamento necessário para o trabalho diário do laboratório de cultura de células, que é usado principalmente para a compreensão diária do crescimento celular e observação se há poluição. Se os fundos permitirem, recomenda-se o uso de um microscópio de contraste de fase de alta qualidade, microscópio anatômico, microscópio fluorescente, sistema de gravação de vídeo ou dispositivo de filmagem com lapso de tempo equipado com um sistema fotográfico para tirar fotos e registrar o crescimento celular a qualquer momento.

3. Incubadora

Como as células in vivo, as células cultivadas in vitro precisam sobreviver a uma temperatura constante. Geralmente, a temperatura ideal de crescimento é de 37 ℃, e a diferença de temperatura não deve exceder ± 0,5 ℃. Quando a temperatura aumenta em 2 ℃, torna-se desfavorável para a sobrevivência das células, e as células morrem logo quando a temperatura atinge acima de 40 ℃. Portanto, a incubadora termostática e a incubadora de CO2 que podem controlar com precisão a temperatura são a melhor escolha.

(1) Incubadora de temperatura constante: deve ser selecionada uma incubadora de controle automático de temperatura do tipo à prova de água ou transistor, que possui alta sensibilidade e controle de temperatura estável. A incubadora termostática geral é mais barata, mas sua desvantagem é que só é adequada para cultivo fechado.

(2) Incubadora de CO2: Atualmente, a maioria das salas de cultura de células tem sido amplamente utilizada. A vantagem da incubadora de CO2 é que ela pode fornecer uma certa quantidade de CO2 (a concentração comum é de 5%) necessária para a cultura de células, e é fácil estabilizar o pH do meio de cultura, que é adequado para ambientes abertos ou semi-abertos. cultura. Ao usar o frasco de cultura, para manter o interior do frasco de cultura ventilado com o mundo exterior, a tampa do frasco pode ser levemente afrouxada. Para evitar a poluição celular, ao usar este método de cultura, o ar na caixa de cultura deve ser mantido limpo e precisa ser desinfetado regularmente com radiação ultravioleta ou álcool. Ao mesmo tempo, o tanque contendo água destilada estéril deve ser colocado na caixa de cultura para evitar a evaporação da solução de cultura,

(3) Consumíveis de cultura de células: pratos, placas ou frascos de cultura podem ser usados ​​para cultura de células.

4. Forno (forno de secagem)

Alguns instrumentos e recipientes usados ​​para cultura de células devem ser secos antes do uso, e as vidrarias devem ser esterilizadas com calor seco. Durante a desinfecção por calor seco, a temperatura no forno geralmente deve atingir mais de 160 ℃, e o forno de jato de ar é geralmente usado. Suas vantagens são temperatura uniforme e bom efeito, enquanto suas desvantagens são o processo de aquecimento lento. Ao aquecer, não é permitido aquecer antes de soprar, mas o sopro e o aquecimento devem começar ao mesmo tempo. Quando a temperatura atingir 100 ℃, o sopro deve ser interrompido. Deve-se tomar cuidado para não queimar o papel ou algodão que envolve os utensílios. Os detritos queimados podem afetar o crescimento das células. Após a desinfecção, a porta da caixa não pode ser aberta imediatamente para evitar a quebra de vidraria devido ao resfriamento súbito.

5. Dispositivo de purificação de água

A qualidade da água para cultura de células é alta. A água para preparar a cultura de células, o líquido relacionado à cultura de células e a água para a limpeza dos utensílios de cultura de células devem ser rigorosamente purificadas com antecedência. Atualmente, há uma variedade de métodos de purificação combinados para tornar o uso de dispositivos de água pura que podem purificar água comum em água pura e água ultrapura muito flexível e conveniente. Eles podem ser montados na parede, de mesa, equipados com tanques de armazenamento de água ou usados ​​diretamente com uma pistola de separação de líquidos. Eles também podem ser configurados com funções de esterilização de acordo com os requisitos de vários tipos de água experimental, removendo efetivamente enzimas de DNA, enzimas de RNA, protease, etc., bem como dispositivos de ultrafiltração de água pura que podem remover efetivamente fontes de calor e endotoxinas.

6. Geladeira

Os equipamentos necessários do laboratório de cultura celular devem ser dedicados e não devem armazenar substâncias voláteis, inflamáveis ​​e outras substâncias nocivas às células, e devem ser mantidos limpos. Geralmente, inclui refrigeradores comuns, refrigeradores de baixa temperatura e refrigeradores de temperatura ultrabaixa.

Refrigerador comum: pode armazenar líquido de cultura, solução salina normal, reagente líquido Hanks e outros artigos de cultura e pode armazenar amostras de tecido por um curto período de tempo.

-20 ℃ refrigerador de baixa temperatura e refrigerador de temperatura ultra-baixa: usado para armazenar preparações que precisam ser congeladas para manter a atividade biológica e precisam ser armazenadas por um longo tempo, como enzimas, soro, etc.

7. Criostato celular

Os recipientes de nitrogênio líquido comumente utilizados no reservatório podem ser divididos em diferentes tipos e especificações de acordo com as necessidades de uso. Três fatores precisam ser considerados ao selecionar um recipiente de nitrogênio líquido: tamanho do volume, fácil acesso e uso e volatilização do nitrogênio líquido. O tamanho do recipiente de nitrogênio líquido é geralmente 25-500L, que pode armazenar cerca de 250-15000 criotubos de 1ml. A temperatura mais baixa do nitrogênio líquido pode chegar a - 196 ℃, então preste atenção para evitar congelamento ao usar. Como o nitrogênio líquido é volátil, é necessário observar a quantidade de nitrogênio líquido restante e suplementá-lo a tempo de evitar danos às células ou morte devido à insuficiência de nitrogênio líquido. Atualmente, existem muitos recipientes de criopreservação de células inteligentes para escolher. Recipientes de nitrogênio líquido equipados com controladores eletrônicos podem realizar criopreservação automática; O nível de nitrogênio líquido e a temperatura da amostra podem ser monitorados para garantir que a temperatura da amostra esteja sempre no ponto de temperatura definido; O sistema de alarme pode ser configurado para alarme em caso de nível de nitrogênio líquido, temperatura, bateria, tensão, fonte de alimentação e outras anormalidades; Ao mesmo tempo, um sistema de desvio de gás quente é fornecido para evitar a entrada de ar quente acima de -130 ℃ no tanque de nitrogênio líquido, de modo a proteger a amostra de forma mais eficaz e evitar o aumento de temperatura no recipiente. Além disso, o tanque de suprimento de nitrogênio líquido pode ser selecionado para complementar o nitrogênio líquido ao tanque de armazenamento através do tubo de conexão para garantir a segurança da amostra. O nível de nitrogênio líquido e a temperatura da amostra podem ser monitorados para garantir que a temperatura da amostra esteja sempre no ponto de temperatura definido; O sistema de alarme pode ser configurado para alarme em caso de nível de nitrogênio líquido, temperatura, bateria, tensão, fonte de alimentação e outras anormalidades; Ao mesmo tempo, um sistema de desvio de gás quente é fornecido para evitar a entrada de ar quente acima de -130 ℃ no tanque de nitrogênio líquido, de modo a proteger a amostra de forma mais eficaz e evitar o aumento de temperatura no recipiente. Além disso, o tanque de suprimento de nitrogênio líquido pode ser selecionado para complementar o nitrogênio líquido ao tanque de armazenamento através do tubo de conexão para garantir a segurança da amostra. O nível de nitrogênio líquido e a temperatura da amostra podem ser monitorados para garantir que a temperatura da amostra esteja sempre no ponto de temperatura definido; O sistema de alarme pode ser configurado para alarme em caso de nível de nitrogênio líquido, temperatura, bateria, tensão, fonte de alimentação e outras anormalidades; Ao mesmo tempo, um sistema de desvio de gás quente é fornecido para evitar a entrada de ar quente acima de -130 ℃ no tanque de nitrogênio líquido, de modo a proteger a amostra de forma mais eficaz e evitar o aumento de temperatura no recipiente. Além disso, o tanque de suprimento de nitrogênio líquido pode ser selecionado para complementar o nitrogênio líquido ao tanque de armazenamento através do tubo de conexão para garantir a segurança da amostra. O sistema de alarme pode ser configurado para alarme em caso de nível de nitrogênio líquido, temperatura, bateria, tensão, fonte de alimentação e outras anormalidades; Ao mesmo tempo, um sistema de desvio de gás quente é fornecido para evitar a entrada de ar quente acima de -130 ℃ no tanque de nitrogênio líquido, de modo a proteger a amostra de forma mais eficaz e evitar o aumento de temperatura no recipiente. Além disso, o tanque de suprimento de nitrogênio líquido pode ser selecionado para complementar o nitrogênio líquido ao tanque de armazenamento através do tubo de conexão para garantir a segurança da amostra. O sistema de alarme pode ser configurado para alarme em caso de nível de nitrogênio líquido, temperatura, bateria, tensão, fonte de alimentação e outras anormalidades; Ao mesmo tempo, um sistema de desvio de gás quente é fornecido para evitar que ar quente acima de -130 ℃ entre no tanque de nitrogênio líquido, de modo a proteger a amostra de forma mais eficaz e evitar o aumento de temperatura no recipiente. Além disso, o tanque de suprimento de nitrogênio líquido pode ser selecionado para complementar o nitrogênio líquido ao tanque de armazenamento através do tubo de conexão para garantir a segurança da amostra.

8. Centrífuga

In cell culture, centrifugation is usually used to prepare cell suspension, adjust cell density, wash and collect cells. 4000 rpm desktop centrifuge is generally configured; To do cell sedimentation, 80-100G centrifugal force is required, because excessive centrifugal force will damage cells. According to different requirements, there are large capacity, adjustable temperature centrifuges, high-speed centrifuges, low-temperature freezing centrifuges and other more functional centrifuges to choose from.

9. Balance

Precision balance and analytical balance are commonly used. The accuracy of the analytical balance is generally 0.1 mg, 0.01 mg and 0.001 mg. Generally, a suitable balance is selected according to the sampling volume and accuracy requirements: a balance with an accuracy of 0.1 mg should be selected when the sampling volume is greater than 100 mg; The sampling amount is 100-10mg, and a balance with an accuracy of 0.01mg is selected; A balance with an accuracy of 0.001 mg should be selected for the sampling volume of 10 mg. The balance needs to be calibrated regularly. The balance with automatic calibration function can be selected for easy maintenance. When using the balance, pay attention to cleanliness, and avoid corrosive powder and liquid directly contacting the weighing platform.