Qual é o tipo de meio de cultura celular e como fazê-lo?
A cultura de células animais consiste em retirar tecidos relevantes do corpo animal, dispersá-los em células individuais (usando tripsina ou colagenase) e, em seguida, colocá-los em um meio de cultura adequado para permitir que essas células cresçam e proliferem.
Quais são os tipos de meios de cultura de células?
De acordo com a história de desenvolvimento dos meios de cultura de células, os meios de cultura de células podem ser divididos em vários tipos, como solução salina balanceada, meios de cultura de células naturais, meios de cultura de células sintéticos, meios de cultura de células sem soro e meios de cultura de células com componentes químicos.
1. Meio de cultura de células DMEM
O DMEM (meio essencial mínimo modificado de Dulbecco) é obtido por Dulbecco com base no meio MEM. A quantidade de cada componente é dobrada e dividida em dois tipos: baixo teor de açúcar (1000mg/L) e alto teor de açúcar (4500mg/L). As células crescem rápido. É melhor usar glicose alta para cultivar células tumorais com baixa adesão e clones, e é frequentemente usado para cultivar células de mieloma de hibridoma e células transformadas transfectadas com DNA.
2. Meio de cultura básico neuronal
Pode fornecer nutrientes básicos para o crescimento dos neurônios.
3. Meio de insetos Ipl-41
O meio de insetos Ipl-41 é projetado para expansão em larga escala da linha celular de Spodoptera frugiperda e também é comumente usado para expressão de proteínas pelo sistema de expressão de baculovírus (BEVS). O meio Ipl-41 é uma melhoria na fórmula IPL original. Foi desenvolvido por Weiss et al. Do laboratório de patologia de insetos do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos. Foi usado para expansão em larga escala de linhagens celulares derivadas de Spodoptera meadowensis. Weiss adicionou soro bovino fetal e meio TPB ao meio básico e realizou com sucesso a cultura contínua em larga escala da linha celular ipl-21 AE (III).
O meio é usado principalmente para cultivar e manter linhagens celulares derivadas de Lepidoptera e amplificar vírus dessas linhagens celulares. O meio Ipl-41 também foi usado para expressar proteína recombinante de baculovírus em células de Spodoptera sem soro.
1,1 solução salina balanceada (BSS)
BSS é composto principalmente de sais inorgânicos e glicose. Sua função é manter o equilíbrio da pressão osmótica das células, manter a estabilidade do pH e fornecer nutrição simples. É usado principalmente para enxaguar células e preparar outros reagentes.
Atualmente, o soro usado para cultura de células é principalmente soro bovino, e algumas células especiais também são cultivadas com soro humano e soro de cavalo. O soro bovino é adequado para a maioria das células de mamíferos, mas não é descartado que seja mais adequado usar outro soro animal ao cultivar certas células. O soro contém várias proteínas plasmáticas, polipéptidos, gorduras, hidratos de carbono, factores de crescimento, hormonas, substâncias inorgânicas, etc. Estas substâncias atingem o equilíbrio fisiológico na promoção do crescimento celular ou na inibição da actividade de crescimento.
1.2 meio de cultura celular sintético
Meio de cultura sintético é um tipo de meio de cultura que é sintetizado, artificialmente projetado e preparado com substâncias químicas de acordo com a composição do meio de cultura natural. O meio básico desenvolvido mais cedo (MEM) é essencialmente uma mistura isotônica de pH tamponado contendo sal, aminoácidos, vitaminas e outros nutrientes essenciais. Nesta base, DMEM, IMDM, presunto F12, prmi1640 e outros meios de cultura de células sintéticas têm sido continuamente desenvolvidos.