Condições nutricionais da cultura de células
Condições nutricionais da cultura de células
1. Meio de cultura
O meio de cultura celular contém vários nutrientes necessários para o crescimento celular, incluindo carboidratos, aminoácidos, sais inorgânicos, vitaminas, etc. , MEM, rpmll640, DMEM, etc.
2. Outros ingredientes adicionados
Além dos nutrientes básicos fornecidos por vários meios sintéticos, outros componentes como soro e fatores devem ser adicionados de acordo com as diferentes células e diferentes finalidades de cultura.
O soro fornece substâncias importantes como matriz extracelular, fator de crescimento e transferrina, e o soro fetal bovino é comumente usado. A proporção de soro adicionado deve ser determinada de acordo com diferentes células e diferentes propósitos de pesquisa. 10% ~ 20% de soro pode manter o rápido crescimento e proliferação de células, que é chamado de meio de crescimento; A fim de manter o crescimento lento ou imortalidade das células, pode-se adicionar 2% - 5% de soro, que é chamado de meio de cultura de manutenção. No entanto, também existem substâncias nocivas ao crescimento e reprodução celular no soro, como complemento, imunoglobulina e alguns fatores inibidores de crescimento; A composição não é clara, o que prejudica a análise dos resultados; A atividade sérica de diferentes animais e diferentes lotes é diferente, o que afeta a estabilidade do efeito da cultura.
A glutamina é uma importante fonte de nitrogênio para o crescimento celular e desempenha um papel importante no processo de crescimento e metabolismo celular. No entanto, a glutamina é muito instável em solução e fácil de ser degradada. Pode ser decomposto em cerca de 50% após 7 dias a 4 ℃, portanto, a glutamina precisa ser adicionada antes do uso.
Para evitar a contaminação, uma certa quantidade de antibióticos deve ser adicionada ao meio de cultura.